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液相色譜柱使用時的注意事項

? ? ? ? 液相色譜柱是實驗室中用于分離和純化化合物的重要工具。然而,使用液相色譜柱時需要注意一些關(guān)鍵事項,以確保其性能和壽命。此外,保持良好的色譜柱性能可以提高分析結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性,這一點對于科研工作者來說,也是至關(guān)重要的。

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? ? ? ??1、流動相和樣品的過濾

? ? ? ??在注入液相色譜系統(tǒng)之前,所有流動相都應(yīng)經(jīng)過過濾,以避免流動相中的雜質(zhì)對色譜柱造成污染。特別是當(dāng)流動相中含有緩沖鹽時,過濾更加重要。另外,所配制的樣品試液在注入流路系統(tǒng)前也要過濾,以防止濾膜溶解而造成污染。要使用與流動相互溶的溶劑進行過濾。

? ? ? ??2、樣品的凈化

? ? ? ??如果樣品中含有對色譜柱有損害的化學(xué)成分,如產(chǎn)生永久性吸附的蛋白質(zhì)、糖等有機分子和強吸附性物質(zhì),進樣前應(yīng)盡可能對樣品進行分離提純以除去多余雜質(zhì)組分。這有助于保護色譜柱,延長其使用壽命。

? ? ? ??3、柱壓的控制

? ? ? ??在液相色譜分析過程中,要避免突然打開或關(guān)閉閥門導(dǎo)致壓力的快速變化,因為這可能會對色譜柱造成損害。當(dāng)柱壓過高時,應(yīng)盡可能采用較小的流速。這樣可以保護色譜柱,并確保分析結(jié)果的準(zhǔn)確性。

? ? ? ??4、溫度和酸堿度的調(diào)節(jié)

? ? ? ??溫度和酸堿度是影響色譜柱性能和壽命的重要因素。溫度過高會加速硅膠的溶解和填料的性質(zhì)改變,從而降低柱效,改變峰形。因此,在使用過程中要注意控制溫度,特別是在使用以硅膠為基質(zhì)的色譜柱時。此外,還要注意流動相的酸堿度,確保其與色譜柱的pH適用范圍相匹配。避免極端的pH條件可以保護色譜柱并延長其使用壽命。

? ? ? ??5、及時的沖洗

? ? ? ??每次使用完畢后,應(yīng)立即用適當(dāng)?shù)娜軇┣逑瓷V柱,以避免殘留物對柱子造成損害。開始試驗前,也要了解柱中當(dāng)前是何種溶劑,以避免溶劑不兼容的情況。通過正確的沖洗步驟可以確保色譜柱的性能穩(wěn)定和延長其使用壽命。

? ? ? ??6、保護柱的使用

? ? ? ??為保護分析柱免受污染和損害,可以加裝保護柱。保護柱的作用是過濾掉來自流動相和樣品的化學(xué)“垃圾”,同時除去流動相和樣品中的不溶物。因此,在分析中藥、中成藥等復(fù)雜混合物和生物樣品時,加裝保護柱是必不可少的措施。建議根據(jù)具體實驗條件和樣品性質(zhì)選擇合適的保護柱,并定期更換。


發(fā)布于: 2023-12-11
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